抗体亲和力成熟
抗原结合亲和力是治疗性抗体关键的性质之一。用于抗体亲和力成熟的方法,包括随机突变、定向突变、链重排和基于计算机的方法等。阿帕克生物提供基于计算机预测的方法设计突变,再通过酵母展示筛选亲和力提高的克隆,保证亲和力提高的10~100倍。
基于计算机结构预测开展抗体亲和力成熟文库设计
计算机预测抗原-抗体相互作用的重要氨基酸残基分析。绿色带表示单链抗体片段,蓝色带表示抗原的N端,黄色球棒表示单链抗体中关键残基,红色带表示抗原中的重要残基。通过计算机设计虚拟文库。
酵母抗体库开展抗体亲和力成熟筛选
根据计算机设计的虚拟文库信息,构建酵母抗体库(Fab)并开展3轮抗体体外筛选,筛选表达量高(anti-Kappa-PE),结合活性强(APC-Ag)的克隆,并开展后续功能验证。
亲和力验证
筛选后利用BLI方法测定改造后突变体亲和力,由结果可知几个突变体亲和力提高几十甚至数百倍。