前言
2022年9月26日，由Ablynx开发的Ozoralizumab在日本获批（英文商品名：Nanozora®），这也是全球首款获批上市的双特异性纳米抗体。Ozoralizumab是一款人源化、三价的双特异性纳米抗体，其含有两个靶向TNF-α的VHH和一个靶向人HSA的VHH。Ozoralizumab采用皮下注射给药，成人剂量为30mg，每4周一次，适用于治疗类风湿性关节炎（RA），尤其适用于对现有治疗反应不充分的RA患者。
Ozoralizumab
Ozoralizumab最初由Ablynx开发，通过将人肿瘤坏血因子(TNF-α)和人血清白蛋白(HSA)进行免疫Llama诱导产生抗TNF-α和抗HSA的纳米抗体，并采用噬菌体展示技术进行筛选获得。
2014年9月，Ablynx将Ozoralizumab在大中华区的开发和商业化授权给亿腾医药(Eddingpharm)。
2015年6月，Ablynx将Ozoralizumab在日本的开发和商业化授权给大正制药(Taisho)。
图1. Ozoralizumab开发的关键里程碑[2]。
结构特征
Ozoralizumab含有3个人源化纳米抗体结构域，其中2个靶向人TNF-α（结合TNF-α的两个亚型），1个与人HSA结合延长药物半衰期，单次给药后平均半衰期t1/2为18.2天。Ozoralizumab的相对分子质量为38 kDa，大约是常规抗体的25%。Ozoralizumab与人TNF-α具有高亲和力(Kd=20.2pmol/L)，通过中和人TNF-α 能够有效抑制肿瘤坏死因子受体与TNF-α的相互作用(IC50=22.5pmol/L)。不同于与Adalimumab，Ozoralizumab不会引起大结构免疫复合物的形成，降低了免疫原性，并且Ozoralizumab不会被Adalimumab诱导的ADA中和。
图2. Ozoralizumab示意图[3]。
临床试验
在随机的52周2/3期的日本OHZORA试验（JapicCTI-184029）中，Ozoralizumab皮下注射单次给药30 mg后，对甲氨蝶呤反应不足的RA患者（药代动力学亚组；n = 77），在中位数144小时内，平均血药峰值浓度Cmax达到4.55 µg/mL，平均AUC∞为3280µg·h/mL。重复给药组中，在第一次用药后16周内出现平均稳态血药浓度，平均Ctroughss ≈2 µg/mL。
Ozoralizumab与甲氨蝶呤同时使用可改善对甲氨蝶呤反应不足的RA患者的临床症状。将联合使用甲氨蝶呤的患者随机分为接受Ozoralizumab 30mg（n = 152），Ozoralizumab 80mg（n = 154）或安慰剂（n = 75）组，每4周一次。为期24周的双盲期，随后是28周的开放标签期。主要终点为第16周时美国风湿病学会20%的改善标准（ACR20反应）和第24周时Sharp/van der Heijde score (SHS)与基线的变化。
从第1周起，Ozoralizumab给药组的ACR20反应与安慰剂相比就显示出显著差异（p < 0.001），ACR50和ACR70的反应也非常明显。在第16周，30mg和80mg组比安慰剂组有更多的患者达到了ACR20反应（79.6%和75.3% vs 37.3%；P < 0.001）。在16和24周时，30mg和80mg的ACR50和ACR70反应也明显高于安慰剂组（P<0.001）。在JapicCTI-184029试验的52周治疗后，接受Ozoralizumab 30 mg和80 mg的患者ACR20有效率仍然很高(分别为92.3%和87.0%)。
图3. 患者分组情况示意图[4]。
图4. 24周内治疗反应率（基于美国风湿病学会20%（ACR20），ACR50和ACR70改善标准）[4]。
A-B，16周（A）和24周（B）的ACR20、ACR50和ACR70改善反应率。
C-E，ACR20(C）、ACR50（D）和ACR70（E）随时间变化的反应率。与安慰剂+甲氨蝶呤（MTX）相比* = P < 0.05; ** = P < 0.01; *** = P < 0.001 。
用药注意事项
包括本药在内的抗TNF药物已经观察到对乙型肝炎病毒的再激活。因此，患者在使用本药前应进行乙肝病毒感染检测。Ozoralizumab不能与abatacept 联合使用 （没有临床益处，而且感染的发生率较高），也不应与其他生物制剂或全身性Janus激酶抑制剂联合使用(同时使用的有效性和安全性尚未确定)。如果在16周内对Ozoralizumab没有反应, 应审查治疗计划，并评估是否应继续治疗。患有严重感染（如败血症、肺炎）、活动性肺结核（TB）、充血性心力衰竭和脱髓鞘疾病的患者禁用Ozoralizumab，因为用药后有可能复发或症状恶化。
小结
与单抗相比，双特异性抗体增加一个特异性抗原结合位点，可以更好的靶向肿瘤细胞表面靶点，并可降低脱靶后毒性效应，但其开发难度和技术壁垒也随着提升。但是纳米抗体凭借只含有一个重链结构域的优势，可以很好的解决传统双抗轻重链错配的难点；此外纳米抗体拥有稳定性强和分子量小的特征，能够降低药物的免疫原性风险并且为给药方式提供了更多的可能。目前，越来越多的药企纷纷布局纳米双抗，例如康宁杰瑞，信达生物，普米斯，Sanofi和Merck等等。Ozoralizumab作为全球首款上市的双特异纳米抗体药物，相信未来将会有更多的纳米双抗/多抗药物上市。
参考资料：
[1].Keam, S.J. Ozoralizumab: First Approval. Drugs (2022).
[2].Ishiwatari-Ogata C, Kyuuma M, Ogata H, Yamakawa M, Iwata K, Ochi M, Hori M, Miyata N, Fujii Y. Ozoralizumab, a Humanized Anti-TNFα NANOBODY® Compound, Exhibits Efficacy Not Only at the Onset of Arthritis in a Human TNF Transgenic Mouse but Also During Secondary Failure of Administration of an Anti-TNFα IgG. Front Immunol. 2022 Feb 22.
[3].Oyama, S., Ebina, K., Etani, Y. et al. A novel anti-TNF-α drug ozoralizumab rapidly distributes to inflamed joint tissues in a mouse model of collagen induced arthritis. Sci Rep 12, 18102 (2022). https://doi.org/10.1038/s41598-022-23152-6
[4].Tsutomu Takeuchi. et al. Phase II/III Results of a Trial of Anti-Tumor Necrosis Factor Multivalent NANOBODY Compound Ozoralizumab in Patients With Rheumatoid Arthritis. Arthritis and Eheumatology. 2022 June 21. https://doi.org/10.1002/art.42273
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